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Protein Research Kit (CFS-PRK-16)

厂家:天根生化科技(北京)有限公司
  目录号 规 格 价 格
CFS-PRK-G16 226 μl×16 rxn 14000元
CFS-PRK-H16 226 μl×16 rxn 14000元
CFS-PRK-S16 226 μl×16 rxn 13000元
产品简介:

本系列试剂盒能够通过线性模板或质粒模板实现蛋白的中量表达。本系列试剂盒采用转录和翻译非偶联的方法,试剂盒中提供包含体外转录所需的酶、NTP和离子环境的Transcription PreMix LM,加入模板后先完成DNA的转录,再配合麦胚无细胞蛋白表达系统预混mix完成mRNA的翻译,该mix中包含蛋白翻译的所有必需酶类、各种tRNA和离子,从而获取目的蛋白。本系列试剂盒利用双层液相反应法(Bilayer)表达目的蛋白,每个反应蛋白表达量为30 μg左右,适合western blotCBB染色等蛋白检测实验和蛋白结构解析以及免疫共沉淀等常见蛋白质功能解析。此外,本系列中的H24G24试剂盒专门为表达His标签蛋白和GST标签蛋白做特殊优化,使得纯化后的蛋白纯度更高。


产品特点:

选择方便:可用质粒模板,也可直接使用PCR片段进行蛋白表达

操作简单:采用Bilayer 反应方法,不需要特殊仪器,只需加入模板即可进行反应

表达高效:一天内完成蛋白表达,蛋白表达量可达30 μg

适用面广:特别针对His标签蛋白或GST标签蛋白的表达进行特殊优化,提高纯度


保存条件

低于-70保存,避免长期存放于干冰环境,反复冻融不超过2次。


实验例


使用质粒作为表达模板时,可以使用pEU系列质粒作为表达载体,将带有起始密码子和终止密码子的cDNA克隆至载体上,提取质粒后直接用于蛋白表达。亦可使用其他带有SP6启动子的表达载体进行蛋白表达,不要使用T7启动子。



使用PCR片段做表达模板时,应使用两步PCR反应,将核糖体结合位点和转录启动子作为上游引物的5’端,经PCR反应结合到片段上。片段纯化后可用于蛋白表达。



蛋白翻译采用双层液相反应法(Bilayer Reaction Method),通过反应液和麦胚裂解物造成的密度差,相互渗透,在液面相交处发生反应。随着时间的推进,溶液逐渐由两相变为单一的混合物而终止。



使用Protein Research Kit表达GFP蛋白,分别用荧光检测(折线图)和考马斯亮蓝(CBB)染色检测(PAGE图)蛋白表达量。转录时间为371小时,翻译温度为15,通过翻译时间梯度展示蛋白表达量。结果显示,翻译4小时即可观测到蛋白表达,20小时可达到最大蛋白表达量。

地址:北京市海淀区西小口路66号东升科技园(北领地)C7-3 电话:800-990-6057
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